Pathogen-specific changes in composition and quality traits of milk from goats affected by subclinical intramammary infections.

We investigated the effects of pathogens associated with subclinical intramammary infections on yield, composition and quality indicators of goat milk. By means of a longitudinal study, individual half udder milk samples (n = 132) were collected at different lactation periods and assessed for milk yield and physicochemical composition, somatic cell count (SCC), total bacteria count (TBC) and microbiological culture. Staphylococci species accounted for the great majority of the isolates (96.1%). Intramammary infections significantly reduced fat and total solids in goat milk and increased both SCC and TBC. However, these indicators were significantly higher in udder halves affected by S. aureus compared with other staphylococci species.

Occurrence of KPC-Producing Escherichia coli in Psittaciformes Rescued from Trafficking in Paraíba, Brazil.

The emergence and spread of antimicrobial resistance pose a threat to public health globally. Antibiotic-resistant bacteria and genes can disseminate among environments, animals and humans. Therefore, investigation into potential reservoirs of multidrug-resistant bacteria is of great importance to the understanding of putative transmission routes of resistant bacteria and resistance genes. This study aimed to report the occurrence of Escherichia coli harboring the Klebsiella pneumoniae carbapenemase-producing gene (blaKPC) in Psittaciformes rescued from wildlife trafficking in Paraíba State, Brazil. Cloacal swabs were collected from thirty birds and cultured by conventional microbiology using MacConkey and serum tryptone glucose glycerol (STGG) media supplemented with selective antimicrobials. E. coli isolates (n = 43) were identified by phenotypic tests and confirmed by MALDI-TOF. Antimicrobial susceptibility profiles were determined by means of Kirby-Bauer test. All isolates were further screened for extended-spectrum beta-lactamase (ESBL) production, and putative genes encoding ESBL were investigated by PCR. Additionally, blaKPC-harboring strains were genotyped by REP-PCR. A total of 43 E. coli phenotypically resistant isolates were recovered. The highest resistance rate was observed against ciprofloxacin. Among the resistance genes, only blaKPC was found in seven different birds from three species. According to the genotyping, these seven isolates belonged to four different strains. To date, this is the first report on the occurrence of KPC-E. coli in Psittaciformes rescued from trafficking in Northeastern Brazil. Due to the high clinical importance of KPC-E. coli, our findings suggest that wild animals in captivity at wildlife rescue centers can play a role as reservoirs of bacteria that are resistance to Critically Important antimicrobials in human medicine.

Draft genome sequence of mcr-1-mediated colistin-resistant Escherichia coli ST359 from chicken carcasses in Northeastern Brazil.

OBJECTIVES: Considering that polymyxin is a drug of last resort in the treatment of humans infected by multidrug-resistant bacteria, the occurrence of plasmid-mediated colistin resistance mcr gene among Gram-negative bacteria in foods must be investigated. We present herein the draft genome sequence of a phenotypically colistin-resistant Escherichia coli carrying mcr-1 in chicken carcasses from a public market. METHODS: Total genomic DNA from the strain was sequenced by means of the Illumina MiSeq. The assembled contigs were annotated and manually curated. In silico analyses were performed to detect significant epidemiologic (serotyping and MLST) and structural features related plasmids identification, virulence and resistome. RESULTS: The ST359 E. coli strain presented a conserved 747 bp mcr-1 gene within a 9431 kb contig compatible with the IncX4 plasmid, which has been identified as a key vector for the global dissemination of mcr determinants among Enterobacteriacea. Other genes encoding for multidrug resistance such as blaCTX-M-2 and blaTEM-1B, and the virulence factors astA, cma, gad, iroN, ipfA, mchF were also detected. CONCLUSION: We reported a draft genome of a colistin-resistant E. coli ST359 associated with an IncX4 plasmid containing the gene mcr-1. The genomic data can be useful in epidemiological and evolutionary investigations on the spread of colistin-resistance among Enterobacteriacea in the food chain.

Accuracy of PCR targeting different markers for Staphylococcus aureus identification: a comparative study using matrix-assisted laser desorption/ionization time-of-flight mass spectrometry as the gold standard.

Staphylococcus aureus is considered a major pathogen in veterinary and human medicine, and the emergence of multidrug-resistant strains, such as livestock-associated methicillin-resistant S. aureus, means that reliable, inexpensive, and fast methods are required to identify S. aureus obtained from animal sources. We tested the accuracy of a PCR targeting the genes femA, nuc, and coa in identifying S. aureus from animals. A total of 157 Staphylococcus spp. isolates were examined by matrix-assisted laser desorption/ionization time-of-flight (MALDI-TOF) mass spectrometry; 18 different Staphylococcus species were identified. Of 68 S. aureus isolates, the genes femA, nuc, and coa were found in 61, 53, and 32 isolates, respectively. Considering MALDI-TOF as the gold standard, the PCR assays targeting all 3 genes showed 100% specificity; the sensitivity values were 89.7, 77.9, and 47.0% for femA, nuc, and coa, respectively. Sensitivity was 100% when femA and nuc markers were targeted simultaneously. These results confirm PCR as an accurate method to identify S. aureus species from animal sources and strongly suggest the simultaneous use of primers targeting femA and nuc genes.

Structure for prevention of health care-associated infections in Brazilian hospitals: A countrywide study.

BACKGROUND: Minimal structure is required for effective prevention of health care-associated infection (HAI). The objective of this study was to evaluate the structure for prevention of HAI in a sample of Brazilian hospitals. METHODS: This was a cross-sectional study from hospitals in 5 Brazilian regions (n = 153; total beds: 13,983) classified according to the number of beds; 11 university hospitals were used as reference for comparison. Trained nurses carried out the evaluation by using structured forms previously validated. The evaluation of conformity index (CI) included elements of structure of the Health Care-Associated Prevention and Control Committee (HAIPCC), hand hygiene, sterilization, and laboratory of microbiology. RESULTS: The median CI for the HAIPCC varied from 0.55-0.94 among hospital categories. Hospitals with >200 beds had the worst ratio of beds to sinks (3.9; P < .001). Regarding alcoholic product for handrubbing, the worst ratio of beds to dispensers was found in hospitals with <50 beds (6.4) compared with reference hospitals (3.3; P < .001). The CI for sterilization services showed huge variation ranging from 0.0-1.00. Reference hospitals were more likely to have their own laboratory of microbiology than other hospitals. CONCLUSION: This study highlights the need for public health strategies aiming to improve the structure for HAI prevention in Brazilian hospitals.

Antibacterial activity of the essential oil of Origanum vulgare L. (Lamiaceae) against bacterial multiresistant strains isolated from nosocomial patients / Atividade antibacteriana do óleo essencial de Origanum vulgare L. (Lamiaceae) contra bactérias multiressistentes isoladas de pacientes nosocomial

Os antibióticos permanecem como a principal opção terapêutica para tratar infecções bacterianas, no entanto, existe a desvantagem de aumentarem a resistência bacteriana, e como alternativa, destaca-se a pesquisa de antimicrobianos de origem vegetal. Neste trabalho objetivou-se determinar in vitro a atividade antibacteriana do óleo essencial de Origanum vulgare L. (Lamiaceae) (orégano), sobre bactérias multirresistentes isoladas de materiais biológicos. Foram usadas 24 linhagens de bactérias de origem hospitalar, divididas em seis espécies distintas, que foram inibidas pelo óleo essencial no "screening" preliminar, realizado utilizando-se a técnica de difusão em ágar. A CIM foi determinada pelo método de microdiluição, partindo-se de soluções com as concentrações finais: 8 até 0,125 por cento com os seguintes resultados: As quatro amostras (100 por cento) de Escherichia coli, Enterococcus faecalis e MRSA foram inibidas pelo óleo essencial na concentração de 0,125 por cento. Três amostras (75 por cento) de Acinetobacter baumannii por 0,125 por cento e uma amostra (25 por cento) por 0,5 por cento; Klebsiella pneumoniae (75 por cento) por 0,125 por cento e 25 por cento por 0,25 por cento; Pseudomonas aeruginosa (75 por cento) por 0,5 por cento e 25 por cento por 0,25 por cento. A CIM variou de 78 a 83 por cento. Concluiu-se com base nos dados obtidos, que não houve diferença na concentração bactericida mínima (0,5 por cento) do referido óleo tanto para os microrganismos Gram positivos quanto para os Gram negativos.

Antibiotics are considered the main therapeutic option to treat bacterial infections; however, there is the disadvantage of increasing bacterial resistance. Thus, the research of antimicrobials of plant origin has been an important alternative. This work aimed at determining the in vitro antibacterial activity of the essential oil of Origanum vulgare L. (Lamiaceae) on multiresistant bacteria isolated from biological materials. 24 strains of nosocomial bacteria were used and divided into six different species that were inhibited by the essential oil in the preliminary "screening" which was accomplished by the diffusion technique in agar. MIC was determined by the microdilution method, beginning with solutions with the final concentrations: 8 up to 0.125 percent with the following results: The four samples (100 percent) of Escherichia coli, Enterococcus faecalis and MRSA were inhibited by the essential oil at the concentration of 0.125 percent. Three samples (75 percent) of Acinetobacter baumannii at 0.125 percent and a sample (25 percent) at 0.5 percent; Klebsiella pneumoniae (75 percent) at 0.125 percent and 25 percent at 0.25 percent; Pseudomonas aeruginosa (75 percent) at 0.5 percent and 25 percent at 0.25 percent. MIC varied from 78 to 83 percent. It was concluded through the obtained data that there was not difference in the minimum bactericidal concentration (0.5 percent) of the referred oil for Gram positive as well for Gram negative microorganisms.

Employing pharmacokinetic and pharmacodynamic principles to optimize antimicrobial treatment in the face of emerging resistance

Antimicrobial efficacy in vivo is not exclusively defined by the activity of an antibiotic as determined in the in vitro susceptibility test. Knowledge of the pharmacokinetics and pharmacodynamics of antimicrobials and all phenomena occurring between antimicrobial agents and microorganisms is imperative. The pharmacodynamic (PD) parameters most often used in studies of antibiotic effect include the following relationships: the maximum free concentration (fCmax) to minimum inhibitory concentration (MIC) ratio, the free area under the curve (fAUC/MIC) ratio and the duration of time the free concentration exceeds the MIC (fT>MIC). Utilization of known pharmacokinetic/ pharmacodynamic surrogate relationships should help to optimize treatment outcome, especially in the face of emerging resistance among Gram-positive and Gram-negative bacteria. Clinical studies in the field of antibacterial PD are still relatively scarce, and much information is needed to enable relevant dosing strategies for all types of antibiotics against all common infections and microorganisms. In this review, the distinctive patterns of antimicrobial activitybased on PD parameters are discussed. Various antibioticsand bacterial pathogens can be used as models to demonstrate the utilityof PD parameters in predicting the in vivo efficacy of antimicrobialtherapy. And finally, the use of computer modeling with Monte Carlo populationsimulations can further enhance the predictability of antimicrobial efficacywhen using PD parameters.

A eficácia antimicrobiana in vivo não pode ser definida exclusivamente pela atividade de um antibiótico determinada por um teste de sensibilidade in vitro. O conhecimento da farmacocinética e farmacodinâmica dos antimicrobianos, assim como de todos os fenômenos que ocorrem entre agentes antimicrobianos e microrganismos é fundamental na interpretação de alguns resultados. Os parâmetros farmacodinâmicos (PD) mais frequentemente usados nos estudos do efeito dos antibióticos incluem os seguintes relacionamentos: a concentração livre máxima (fCmax) com relação à concentração inibitória mínima (CIM), a área livre sob a curva (fAUC/CIM) e a duração do tempo em que a concentração livre excede a CIM (fT> CIM). A utilização dos dados conhecidos de farmacocinética/farmacodinâmica devem ajudar a otimizar o resultado dos tratamentos adotados, especialmente com relação à resistência emergente entre as bactérias Gram-positivas e Gram-negativas. Os estudos clínicos no campo da farmacodinâmica dos antimicrobianos ainda são relativamente escassos, e muita informação é necessária para permitir estratégias de dosagem relevantes para todos os tipos de antibióticos contra a todas as infecções e microorganismos comuns. Nesta revisão, os padrões distintos da atividade antimicrobianabaseado em parâmetros de farmacodinâmica são discutidos. Vários antibióticose patógenos bacterianos podem ser usados como modelos para demonstrar a utilidadede parâmetros de farmacodinâmica em predizer a eficácia in vivo da terapia antimicrobiana. E finalmente, o uso da modelagem computadorizada utilizando a simulação de Monte Carlo em determinadas populações podem realçar ainda mais o valor preditivo e a eficácia antimicrobiana quando se utilizam parâmetros de farmacodinâmica nas interpretações.

Cepas de Pseudomonas spp. produtoras de metalo-betalactamase isoladas no Hospital Geral de Fortaleza / Metallo-betalactamase producing Pseudomonas spp. strains isolated in the Hospital Geral de Fortaleza

Pseudomonas sp. é um bacilo gram-negativo ubíquo de vida livre e freqüente em ambientes hospitalares. Bactérias produtoras de metalo-betalactamases (MBLs) são em grande parte resistentes aos betalactâmicos de largo espectro, incluindo cefalosporinas e carbapenens. Este trabalho objetivou detectar cepas de Pseudomonas spp. resistentes ao imipenem e à ceftazidima, assim como identificar aquelas produtoras de MBLs. Foram estudadas (entre junho de 2002 e junho de 2003) 311 cepas isoladas de diversas amostras clínicas no Hospital Geral de Fortaleza (HGF), bem como foram realizados testes de identificação e sensibilidade pelo sistema de automação MicroScan®/WalkAway, sendo as cepas multirresistentes confirmadas através do método de difusão em disco. A triagem para detecção de amostras produtoras de MBLs foi realizada pelo método de dupla difusão, utilizando discos com mercaptoacetato de sódio. Entre essas amostras, 24 (7,71 por cento) demonstraram produção de MBLs e padrão de multirresistência entre as cepas estudadas. Os antimicrobianos para os quais as cepas apresentaram maior sensibilidade foram a piperacilina/tazobactam com 255 (82 por cento) de sensibilidade, seguido da piperacilina isoladamente, com 229 (73,63 por cento); imipenem com 195 (62,70 por cento); ticarcilina/ácido clavulânico com 193 (62,05 por cento); e ceftazidima com 138 (44,37 por cento). A detecção dessas amostras configura um problema emergente, com importantes implicações na terapêutica antimicrobiana.

Pseudomonas sp. is a ubiquitous gram-negative bacilli, of free and frequent life in hospital environment. Metallo-betalactamases (MBLs) productive bacteria are largely resistant to betalactamics of wide spectrum, including cephalosporin and carbapenem. The objective of this work was to detect Pseudomonas spp. strains resistant to imipenem and ceftazidime, as well as to identify the MBLs producer ones. It was studied 311 isolated strains from several clinical samples at Fortaleza General Hospital (FGH), from June 2002 to June 2003. Identification and sensibility tests were done by the MicroScan®/WalkAway automation system. The multiresisting strains were confirmed by the diffusion method in disk. The triage to detect MBLs productive samples was accomplished by the double diffusion method, using disks containing sodium mercaptoacetat. Among these samples, 24 (7.71 percent) indicated production of MBLs and multiresistance standard in the midst of the studied strains. The antimicrobials to which the strains presented larger sensibility were piperacillin/tazobactam, with 255 (82 percent) of sensibility, followed by isolated piperacillin with 229 (73.63 percent); imipenem with 195 (62.70 percent); ticarcillin/clavulanic acid with 193 (62.05 percent); and ceftazidime with 138 (44.37 percent). The detection of these samples configures an emerging problem, with important implications in the antimicrobial therapeutic.

Ação antimicrobiana de óleos essencias sobre microrganismos potencialmente causadores de infecções oportunistas / Anti-microbial action of essential oils against microorganisms potentially causing opportunistic infections

Os processos infecciosos causados por agentes microbianos são muito frequentes no Brasil, em consequência de seu clima tropical. Esses processos afetam pele, pêlos, unhas, mucosas, tecido subcutâneo, órgãos e sistemas. Como as infecções bacterianas e fúngicas são tratadas por meio da correção de fatores predisponentes e da terapêutica medicamentosa, este estudo se propõe a avaliar o potencial antimicrobiano de óleos essenciais, obtidos de plantas medicinais, contra diversas espécies microbianas conhecidas como potencialmente causadoras de infecções oportunistas, incluindo bactérias e fungos. Os resultados evidenciaram uma proeminente atividade antimicrobiana dos óleos essenciais de Cinnamomum zeylanicum Blume a 4 por cento de Coniza bonariensis L. a 4 por cento e de Lippia alba N. E. Brown a 8 por cento, os quais inibiram o crescimento de 72 por cento, 61 por cento e 44 por cento, respectivamente, das cepas testadas, apresentando halos de inibição do crescimento microbiano entre 10 e 24 mm de diâmetro.

Investigação sobre colonização bacteriana de mãos de profissionais de enfermagem / Investigate the hands colonization among nursing professional

A colonização das mãos dos profissionais de Enfermagem por bactérias é um problema no hospital. Assim, a presente pesquisa teve, por objetivos, a investigação dessa ocorrência nas Unidades de Internação e no Bloco Cirúrgico e a análise do quantitativo de tais patógenos nas mãos dos profissionais antes e depois da utilização do álcool gel. Este estudo experimental foi desenvolvidono Hospital universitário e Núcleo de Medicina Tropical da Universidade Federal da Paraíba (UFPB), no período de outubro de 2000 a maio de 2001. Investigamos as mãos de 116 trabalhadores, dos quais 37 enfermeiros e 79 técnicos e auxiliares. Os resultados evidenciaram a prevalência de colonização por bactérias grampositivas. A análise estatística revelou que o valor médio de colônias/enfermeiro foi de 2,59, número que, nos técnicos, chegou a 2,60. Já o uso do álcool gel apresentou eficácia em 53,3 por cento dos achados. Como conclusão, mostramos a importância da colonização no controle de infecções e recomendamos a utilização do álcool gel como agente eficaz para a lavagem higiênica das mãos, prática que retrata uma visão inovadora na conduta assistencial.

Caracterização microbiológica do leite humano procesado em banco de leite de João Pessoa - PB / Microbiologic characterization of human milk processed from milk bank in João Pessoa, Paraíba/Brazil

O leite constitui um excelente meio de cultura que permite a multiplicação de um grande número de espécies de microrganismos. A manutenção da qualidade do leite pasteurizado depende de muitos fatores desde a ordenha até o consumo, incluindo qualidade bacteriológica do leite cru, condições de pasteurização e condições higiênico-sanitárias. Neste trabalho, objetivamos verificar a qualidade do leite humano "in natura" e pauteurizado, fornecido pelo Banco de Leite Humano Anita Cabral (BLHAC) aos recém nascidos de João Pessoa. As análises evidenciaram 100 porcento de positividade para bactérias mesófilas, nas amostras de leite humano cru. Apenas 6 amostras apresentaram-se dentro dos limites estabelecidos, comparado com os padrões microbiológicos exigidos pela legislação vigente. Das 30 amostras de leite cru analisadas, foram isolados K.pneumoniae (25,5 porcento), E. coli (1,8 porcento), Staphylococcus coagulase negativa (41,8 porcento, S. aureus (12,7 porcento), E. faecalis (3,6 porcento), P. aeruginosa (5,5 porcento) e C. albicans (9,1 porcento). A análise microbiológica do leite humano pasteurizado mostrou a eficácia deste processo em 100 porcento das amostras. Foi confirmada a contaminação do leite pasteurizado e rejeitado pelo controle da qualidade do BLHAC. Sendo que das 15 amostras rejeitadas de leite pasteurizado pelo controle da qualidade, 40 porcento foram positivas, para bactérias mesófilas. Em três (20 porcento), detectou-se a presença de coliformes. Em duas (13 porcento) a presença de B. cereus. A pesquisa de fungos filamentosos e leveduras foi negativa em todas as amostras. O BHI possibilitou o crescimento de A. baumannii em três amostras (20 porcento), o que havia sido detectado nas análises anteriores e revelou dois novos casos de positividade para P. aeruginosa (13 porcento). Conclui-se que a avaliação microbiológica deve ser obrigatoriamente instituída como rotina.

Reprodutibilidade de teste salivar para microbiota cariogênica / Reproduction salivary test for bacterium of the caries

Este estudo avaliou a reprodutibilidade (RE) e o nível de concordância interexaminador (Coln) do teste colorimétrico qualitativ NO CARIES, em condições normais de uso. Este produto fornece dois tubos teste, um para Streptococcus mutans e outro para Neisseria bucalis, empregando-os em conjunto para a elaboração do diagnóstico final, seguindo um escore de trës cores. Foram utilizadas 11 amostras de saliva não-estimulada, seguindo as recomendações do fabricante. Construi-se apartir de cada amostra de saliva, dois diagnósticos (x e x1). Os resultados foram lidos por cinco examinadores, de forma independente e cega. Os resultados indicam 55 pares de diagnósticos, onde se verificou RE satisfatória em 20 pares, perfazendo 36,4 por cento de amostra, com coeficiente Kappa variando de 0,022 a 0,275, indicando concordância fraca à sofrivel (p=0,05). Para análise da Colin utilizou-se o Teste de Friedmann, com nível de significância de 5 por cento, onde o valor alcançado de 9,25 aceita a hipótese Ho (todos os examinadores concordam entre si). Conclui-se que: a) a RE do teste foi insastifatória; b) a variabilidade do diagnóstico em função do leitor é desprezível, sendo um parãmetro seguro. Sugere-se novo estudo acerca da RE do produto, visto que condições de uso não esclarecidos pelo fabricante podem ter interferido nos resultados

Tipagem molecular de amostras de pseudomonas aeruginosa produtoras de metalo-ß-lactamases isoladas em João Pessoa/PB / The presence of pseudomonas aeruginosa strains producing MBLs isolated in João Pessoa, Paraíba, Brazil

Pseudomonas aeruginosa é um patógeno oportunista que apresenta um alto nível de resistência aos antimicrobianos, sendo freqüentemente isolado com capacidade de produzir metalo ß-lactamases (MBLs), que são enzimas com atividade sobre vários ß-lactâmicos, incluindo cefamicinas e carbapenens. O trabalho teve por objetivo confirmar por tipagem molecular a presença de linhagens de pseudomonas aeruginosa produtoras de MBLs já detectadas por métodos fenotípicos. Foram analisadas 250 amostras não repetitivas de P. aeruginosa identificadas por métodos de rotina. Foram consideradas para análise as cepas que mostraram-se multirresistentes, com diminuição de sensibilidade ao imipenem (halo<16mm) e a ceftazidima (halo<18mm). Estas foram submetidas aos testes fenotípicos de dupla difusão com discos em superfície de agar e ao método E-test padronizados para a detecção de MBLs, confirmadas pelo método molecular de PCR. Como resultado foi obtido um percentual de 14,8 porcento de resistência cruzada ao imipenem/ceftazidima com identificação de (8/250) 3,2 porcento de amostras produtoras de MBLs, das quais 75 porcento foram caracterizadas como SPM-1 e 25 porcento como IMP-1. Destacando-se a importância do isolamento de amostras com o gene SPM-1 em nosso meio, sem que haja um relacionamento epidemiológico. O aparecimento destes tipos de amostras se configura um problema emergente, com importantes implicações na terapêutica antimicrobiana e necessitando, portanto, de maior investigação através de metodologia molecular mais discriminatória, para melhor caracterizar a extensão do problema.

Determinaçäo da produçäo de metalo-beta-lactamases em amostras de Pseudomonas aeruginosa isoladas em Joäo Pessoa, Paraíba / Detection of metallo-beta-lactamase producing Pseudomonas aeruginosa isolated in Joäo Pessoa, Paraíba, Brazil

Bactérias produtoras de metalo-beta-lactamases (MBLs) säo em grande parte resistentes aos betalactâmicos de largo espectro, incluindo oximino-aminotiazol cefalosporinas e também aos carbapenens. O objetivo deste trabalho foi detectar cepas de Pseudomonas aeruginosa resistentes ao imipenem e à ceftazidima, assim como identificar aquelas produtoras de MBLs. Foram estudadas 198 linhagens näo-repetitivas isoladas de diversas amostras clínicas, hospitalares e comunitárias, identificadas bioquimicamente por técnicas de rotina. A triagem para a detecçäo de amostras produtoras de MBLs foi realizada pelo método de dupla difusäo proposto por Arakawa et al. (2000) e modificado por Nakajima et al. (2001), utilizando discos contendo mercaptoacetato de sódio. Foi detectado um percentual de resistência de 19,7 por cento (39/198) ao imipenem e de 15,2 por cento (30/198) à ceftazidima, com 10,1 por cento (20/198) de resistência cruzada aos dois antimicrobianos. Entre estas amostras, 2 por cento (4/198) demonstraram produçäo de MBLs e padräo de multirresistência. A detecçäo destas amostras configura um problema emergente, com importantes implicaçöes na terapêutica antimicrobiana, necessitando, portanto, de maior investigaçäo através de metodologia molecular, para melhor caracterizar a extensäo do problema

Análise do perfil de resistência de enterobactérias produtoras de ß-lactamases de espectro ampliado (ESBL) isoladas em Joäo Pessoa, PB / Resisteance profile of enterobacteriaceae producing extended-spectrum ß-lactamases (ESBL) isolated in Joäo Pessoa/PB, Brazil

A prevalência crescente de amostras produtoras de betalactamases de espectro ampliado ESBL representa um impacto significativo na prescriçäo de antimicrobianos, considerando-se que a produçäo dessas enzimas constitui o principal mecanismo de resistência das enterobactérias. Foram estudadas 545 linhagens de enterobactérias isoladas de amostras clínicas, oriundas de diferentes laboratórios na cidade de Joäo Pessoa/PB, no período de janeiro a novembro de 2000, as quais foram identificadas bioquimicamente por técnicas de rotina. Realizaram-se testes de sensibilidade aos antimicrobianos, procedendo-se uma identificaçäo presuntiva inicial de amostras ESBL com base no perfil de resistência apresentado, utilizando-se critérios aprovados pelo NCCLS. Os testes confirmatórios da produçäo dessas enzimas foram executados pelas técnicas de disco aproximaçäo e E-test (AB BioDisk). Os dados foram analisados determinando-se a prevalência de bactérias produtoras de ESBL, fazendo-se um paralelo entre o aparecimento dessas amostras e o insucesso terapêutico de antimicrobianos usados no tratamento de rotina de enterobactérias. Foram caracterizadas na triagem preliminar 108 (19,8 porcento) amostras suspeitas de serem produtoras de ESBL, dessas 45 (41,7 porcento) evidenciaram resistência cruzada à ceftriaxona, com uma confirmaçäo de 11 (10,2 porcento) linhagens caracterizadas como ESBL a partir de testes confirmatórios. Este fato deverá provocar alteraçöes na terapêutica adotada, considerando-se o elevado perfil de resistência desse tipo de microrganismos

Isolamento de amostras multirresistentes de staphylococcus aureus em estetoscópios usados no ambiente hospitalar / Staphylococcus aureus multi-resistant strains isolation from stethoscopes used in nosocomial enviroment

O estetoscópio pode ser considerado o instrumento de trabalho mais utilizado na atividade diária dos médicos e pessoal hospitalar. No entanto, pouca atençäo tem sido dispensada aos cuidados básicos no seu manuseio, principalmente, no que se relaciona aos cuidados primários de limpeza e desinfecçäo. Até o momento, näo existem procedimentos bacteriológicos padronizados para investigar a presença de bactérias em tais instrumentos. Deste modo, a partir de técnicas simples, nosso objetivo foi determinar o nível de contaminaçäo de estetoscópios analisados aleatoriamente em algumas clínicas do hospital a partir de uma situaçäo näo epidêmica. Foi estudado um total de 98 estetoscópios utilizados em quatro hospitais com diferentes características na cidade de Joäo Pessoa/PB. A coleta do material foi realizada, passando-se, vigorosamente, um "swab" no diafragma dos estetoscópios. A amostra foi subcultivada por plaqueamento nos meios de Agar Mueller-Hinton (BBL) acrescido de 5 porcento de sangue desfibrinado de carneiri e Agar Manitol Salgado (BBL), e incubados durante 24h a 350C, para verificaçäo de crescimento bacteriano. O crescimento foi caracterizado pela intensidade do desenvolvimento de colônias, procedendo-se entäo a identificaçäo das bactérias a partir de características de crescimento e utilizaçäo de técnicas padronizadas de rotina. Os testes de sensibilidade foram determinados pelo método da difusäo com discos de acordo com recomendaçöes do NCCLS, utilizando-se bateria padräo dde drogas. Foram isoladas 96 amostras bacterianas sendo 19/96 (19,8 porcento) staphylococcus aureus, 72/96 (75,0 porcento) staphylococcus epidermidis e 05/96 (5,2 porcento) de outras espécies, em alguns casos houve a associaçäo das duas bactérias em uma única amostra coletada. No entanto, o achado mais interessante foi que, entre as amostras de staphylococcus aureus isoladaas, houve a determinaçäo de 05/19 (26,3 porcento) de linhagens resistentes à meticilina (MRSA). Este fato caracteriza o potencial de ocorrência de infecçäo cruzada e disseminaçäo de amostras multirresistentes no ambiente hospitalar, havendo a necessidade da adoçäo de medidas de descontaminaçäo periódica e rotineira dos estetoscópios

Analysis of the clonal diversity of Staphylococcus aureus methicillin-resistant strains isolated at Joäo Pessoa, state of Paraíba, Brazil

To investigate the clonal diversity of Staphylococcus aureus strains isolated at Joäo Pessoa, state of Paraíba, Brazil, digested genomic DNA were studied by pulsed-field gel electrophoresis (PFGE) in nine methicillin-resistant strains (MRSA) and three methicillin-sensitive strains (MSSA), selected among 67 isolates based on their antimicrobial susceptibility and epidemiology. The isolates were obtained between April and November 1992 from the Hospital of the Federal University of Paraíba, located in Joäo Pessoa. Two MRSA isolates from the Oswaldo Cruz Hospital, Säo Paulo, Brazil, including an epidemic strain previously detected from different hospitals at the country were used as control. Five different patterns, were demonstrated by MRSA isolated in Joäo Pessoa and these patterns were described in several epidemiologically unrelated hospitals in Säo Paulo. Our results suggest the interstate dissemination of a MRSA clone in Joäo Pessoa which is similar to that described in other cities of Brazil.

Padräo de resistência a quinolonas de amostras multiresistentes de Staphylococcus aureus de origem hospitalar / The resistance pattern to quinolones with 12 staphylococcus aureus multiresistance samples from hospitals

Foi realizado um estudo do padräo de resistência às quinolonas em amostras de staphylococcus aureus oxacilina resistentes (ORSA) isoladas de pacientes internos no Hospital Universitário "Lauro Wanderley" (HU/UFPb). Utilizando 12 amostras bacterianas caracterizadas fenotipicamente em termos de identificaçäo, sorologia, triagem em agar e teste de sensibilidade aos microbianos utilizando-se as seguintes quinolonas: ácidos nalidíxico, ácido pipemídico, norfloxacin, pefloxacin, ciprofloxacin, lomefloxacin e ofloxacin. Os resultados demonstraram que das 12 amostras de ORSA a maioria foi proveniente da Clínica Cirúrgica 08/12 (66,8 por cento), e relacionando o isolamento bacteriano ao sítio anatômico verificou-se que houve a predominância de amostras clínicas provenientes de ferida cirúrgica 07/12 (58,3 por cento). Com relaçäo ao teste de sensibilidade às drogas, verificou-se uma média de resistência de 53,0 por cento. Entre as quinolonas testadas às quais as bactérias apresentaram maior índice de sensibilidade destacam-se: Oflaxacin (83,3 por cento), Ciprofloxacin e Lomefloxacin (75,0 por cento), e Pefloxacin (58,3 por cento). Enquanto as que apresentaram menor eficácia foram: Nalidíxico (8,4 por cento) e Pipemídico (16,7 por cento)

Evolution of drug-resistance in Staphylococcus aureus from a Brazilian university hospital

Foram determinadas as frequências da resistência a drogas em isolados de Staphylococcus aureus obtidos em 1991 no Hospital da Universidade Federal da Paraíba. Dos isolados ensaiados, 28,6 por cento eram resistentes à meticilina (MRSA) e 71,4 por cento sensíveis (MSSA). Resistência à penicilina foi a mais freqüente, igualmente distribuída entre os isolados MRSA e MSSA. Resistência à tetraciclina, eritromicina, gentamicina, cloranfenicol, sulfametoxazol/trimetoprim e cefalotina foram mais freqüentes nos isolados MRSA. Deve ser ressaltado que 85,7 por cento dos isolados MRSA eram resistentes a seis ou sete drogas, enquanto que 80 por cento dos isolados MSSA eram resistentes a duas ou menos drogas. Todos os isolados resistentes à gentamicina também o eram à tobramicina, à canamicina e à amicacina, mas sensíveis ao cloreto de benzalcônio, à cetrimida e ao brometo de etídio, o que indica localizaçäo cromossômica (e näo plasmidial) do determinante genético para resistência a aminoglicosídios. Os resultados, algo diferentes dos obtidos três anos antes (Rev. Lat.-amer. Microbiol 34:171-3, 1992), mostram a importância da resistotipagem periódica a fim de se distinguir as novas linhagens epidémicas de S. aureus daquelas endêmicas, bem como para um melhor entendimento da evoluçäo da resistência a drogas em um ambiente particular

Fagotipagem e resistencia as drogas de amostras de Staphylococcus aureusmultiresistentes no HU/UFPB / Phage typing and drug resistence in multiple-antibiotic-resistant Staphylococcus aureus in a university hospital

Foi realizado um estudo epidemiologico de 38 amostras de Staphylococcus aureus isolados de pacientes internos no Hospital Universitario da UFPb. Em sua aioria, aslinhagens estudadas apresentaram multiresistencia as drogas, das quais 31,6% demonstraram resistencia a oxacilina (ORSA). A partir de testes de sensibilidade as drogas determinou-se o padrao de resistencia das amostras estudadas, com especial atençao as amostras ORSA nas quais foi detectada uma resistencia media de 75,0% a bateria de drogas utilizadas. As amostras foram submetidas a fagotipagem utilizando a RTD e100xRTD obtendo-se 22/38 (57,9%) de amostras tipaveis, sendo a maioria 11/22 (50,0%) caracterizada no grupo fagico III. No entanto,considerando o elevado numero de amostras nao tipaveis, e que coincidiu em grande parte dos casos com cepas de resistencia elevada, concluimos ser necessario a utilizaçao de tecnicas moleculares para melhor estabelecer a analise epidemiologica.